Анализ семени самцов сельскохозяйственных птиц

Анализ эякулята (нативного или размороженного) самцов сельскохозяйственных птиц методами оптической микроскопии проводится в научно-исследовательских организациях, селекционно-генетических центрах и племенных хозяйства по птицеводству.

Анализ подвижности

Семя самцов птиц по морфологии и характеру движения отличается от сперматозоидов человека, лошадей, свиней и других животных, имеющих округлую форму головки. Например, сперматозоиды петухов имеют уплощённую вытянутую головку и длинный хвост.

По этой причине алгоритм компьютерного анализа изображений, разработанный для других морфологических форм, не годится для анализа семени птиц.

Компанией ООО АргусСофт совместно с Всероссийским научно-исследовательским институтом генетики и разведения сельскохозяйственных животных – филиал Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный исследовательский центр животноводства – ВИЖ имени академика Л. К. Эрнста» (ВНИИГРЖ) была разработана оригинальная методика компьютерного анализа подвижности сперматозоидов петухов Подвижность Poultry.

Методика Подвижность POULTRY (https://argussoft.org/metodika-podvizhnost-poultry/) выполняет оценку концентрации и характера подвижности сперматозоидов в соответствии с требованиями документа ГОСТ 32277-2013 Межгосударственный стандарт Средства воспроизводства. Сперма. Методы испытаний физических свойств и биологического, биохимического, морфологического анализов и ГОСТ 27267-2017 Межгосударственный стандарт. Средства воспроизводства. Сперма петухов и индюков неразбавленная свежеполученная в нативном («живом») препарате эякулята. Анализ проводится на видеороликах, снятых как в режиме проходящего света, так с фазовым контрастом.

Методика «Подвижность Poultry» сперматозоидов для оценки подвижности сперматозоидов петухов может быть использована в племенных птицеводческих хозяйствах (племзаводы, репродукторы I и II порядка), научно-исследовательских учреждениях и генофондных хозяйствах в селекционных целях и для повышения качества биоматериалов криобанка репродуктивных клеток

Анализ фрагментации ДНК

Целостность ДНК сперматозоидов имеет важное значение в их функциональной полноценности.  Хроматин сперматозоидов плотно и компактно упакован, чтобы защитить ДНК во время доставки материалов наследственной информации в процессе достижения яйцеклетки и собственно оплодотворения. Однако эта конденсация не может принести в жертву хромосомные элементы, которые необходимы эмбриону для доступа к правильным последовательностям отцовского генома для правильного начала программы эмбрионального развития.

Оценка целостности ДНК важна для предотвращения нарушений на этапах оплодотворения и раннего развития эмбриона.

Методика Фрагментация  POULTRY (https://argussoft.org/metodika-fragmentacziya-dnk-poultry/ ) выполняет оценку степени фрагментации сперматозоидов сельскохозяйственных птиц в соответствии с требованиями документа ГОСТ 32277-2013 Межгосударственный стандарт Средства воспроизводства. Сперма. Методы испытаний физических свойств и биологического, биохимического, морфологического анализов и ГОСТ 27267-2017 Межгосударственный стандарт. Средства воспроизводства. Сперма петухов и индюков неразбавленная свежеполученная в нативном («живом») препарате эякулята.

Анализ проводится на изображениях препаратов, окрашенных Toluidine blue по методике Beletti ME, Mello ML. Comparison between the toluidine blue stain and the Feulgen reaction for evaluation of rabbit sperm chromatin condensation and their relationship with sperm morphology. Theriogenology. 2004 Aug;62(3-4):398-402. doi: 10.1016/j.theriogenology.2003.10.016., модифицированной по плану проекта РНФ № 19-16-00009П для сперматозоидов петухов: фрагментированные клетки окрашиваются интенсивно, не фрагментированные – слабо окрашиваются. Также есть промежуточный средне окрашенный вариант.

Список публикаций научно-исследовательских работ, в которых был применён метод анализа семени петухов на анализаторе CASA с программным обеспечением АРГУС-CASA (методики Poultry):

  1. Оценка цитологической целостности и функциональной полноценности оттаянных сперматозоидов петухов (gallus gallus domesticus l.) под воздействием антиоксидантных компонентовкриозащитных сред инозитола и наночастиц оксида цинка (нч zno)». Силюкова Ю.Л., Федорова Е.С., Станишевская О.И. Сельскохозяйственная биология. 2024. Т. 59. № 6. С. 1179-1191.
  2. Сохранение биологической полноценности мужских гамет gallus gallus domesticus при криоконсервации и лиофилизации Силюкова Ю.Л. диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук / Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Федеральный научный центр животноводства — ВИЖ имени академика Л.К. Эрнста». 2024.
  3. Влияние митохондриально-направленного антиоксиданта mito-tempo на показатели качества спермы петухов в цикле криоконсервации и лиофилизации. Курочкин А.А., Станишевская О.И., Силюкова Ю.Л., Плешанов Н.В. Международный вестник ветеринарии. 2023. № 4. С. 370-378.
  4. Липидный состав плазматических мембран сперматозоидов петухов (gallus gallusdomesticus) и его динамика в процессе криоконсервации Станишевская О.И., Силюкова Ю.Л. Международный вестник ветеринарии. 2023. № 4. С. 379-387.
  5. Trehalose as a stabilizer of the lipid composition of membranes and the composition of the cytosol of frozen/thawed rooster spermatozoa Stanishevskaya O.I., Silyukova Yu.L., Tereshina V., Ianutsevich E., Pleshanov N., Kurochkin A., Fedorova E. Agriculture. 2023. т. 13. № 7. с. 1387.
  6. Изменение кинетических показателей и цитологических характеристик сперматозоидов петухов под влиянием технологических факторов Силюкова Ю.Л., Федорова Е.С., Станишевская О.И. Российская сельскохозяйственная наука. 2023. № 5. С. 64-68.
  7. Effects of trehalose supplementation on lipid composition of rooster spermatozoa membranes in a freeze/thaw protocol Stanishevskaya O.I., Silyukova Yu., Fedorova E., Pleshanov N., Kurochkin A., Tereshina V.M., Ianutsevich E. Animals. Т. 13. № 6. С. 1023.
  8. Influence of technological stages of preparation of rooster semen for short-term and long-term storage on its quality characteristics Silyukova Yu.L., Fedorova E.S., Stanishevskaya O.I.Current Issues in Molecular Biology. Т. 44. № 11. С. 5531-5542.
  9. A successful protocol for achieving anhydrobiosis of gallus gallus domesticus spermatozoa while maintaining their fertility in vivo Stanishevskaya O., Silyukova Y., Pleshanov N., Kurochkin A., Fedorova E., Radaev A.A. Cryobiology. 2021. Т. 103. С. null.
  10. Role of mono-and disaccharide combination in cryoprotective medium for rooster semen to ensure cryoresistance of spermatozoa Stanishevskaya O., Silyukova Y., Pleshanov N., Kurochkin A. Molecules. 2021. Т. 26. № 19.